關於 primer pcr ，我們在網路上蒐集到這些相關的討論、資訊與評價

那時，彼得進前來，對耶穌說：「主啊，我跑PCR若失敗了，我當重跑幾次呢？到七次可以嗎？」 耶穌說：「我對你說，不是到七次，乃是到七十個七次。」

PCR（聚合酶連鎖反應），是利用懂得複製DNA的「聚合酶」，不斷將指定DNA複製倍化的過程。COVID的PCR檢測，就是以此技術為基礎，加上螢光訊號，讀出DNA相對的含量。

那麼，聚合酶如何知道複製什麼片段？就是靠一對稱為引物(Primer)的短序列片段，一個標註起始序列，一個標註結束聚列。這就像Word的find功能，請你幫我從「so I say I love you」，複製到「笑著去吃苦」。不過，這只是完美情況的講法，因為引物可能會有偏差，把”so I say I f**k you”開始的片段也複製出來，況且，本來就有很多歌有”so I say I love you”，就算不偏差，也會複製錯別的歌。

要知道跑出來的東西是否正確，其中一個方法，是把成品DNA放在大菜糕上，用電場使本帶負電荷的DNA從負極游泳泳到正極。由於不同大小的DNA，游泳速度是不同的，可以藉此看到DNA大小。如果你看到是37字大小的DNA，就知道複製對了姜B的歌。這方法叫電泳(electrophoresis)，不過無論中英我們也會說DNA在「跑」。

圖中就是最後一次PCR實驗的電泳結果。這週，我共試了五對Primers，八個溫度設定，兩種聚合酶，總共跑了七個七次，終於跑出一點結果。上面那排，是基於兩篇不同文章，分別發表，聲稱有用的Primers，跑出狗屎一樣的雜訊。（因為誤信他們，在此之前我已經跑了六次。）下面藍色的，才是目標DNA。

人家聲稱是已「最佳化」的PCR，不要信，自己跑一下才知道。要不跑出狗屎也當真，就不太好啦。

（不要問有些Lane為什麼這麼醜，我沒變Hulk用金居福爆橘拳捏爆他已經非常好脾氣了。）

#得罪了PCR小精靈

🇦🇩 週末安道爾遠足記 ｜天使的三滴眼淚 - Tristaina高山湖泊群

上週末看氣象預報說安道爾會下雨，我趁還在期限內，趕緊上網把房間免費取消了。我把這件事跟豪斯說，沒想到他一臉不以為然，覺得下雨就下雨，安道爾肯定有漂亮的雨景，說什麼都要我再把房間給訂回來。好吧，看他這麼有遊興，我就又訂了同一處的住宿，但再加上兩客早餐，免得到時下雨還要外出覓食。

由於是週末的小旅行，我們習慣等當天起床後，先把貓咪兩天內可能需要的食物和水準備好，貓砂也清得很乾淨，然後才拿出小行李箱，隨意塞了一些物品進去。一個小時後，我們就已經在往安道爾的高速公路上了。

目前疫情仍是籠罩在歐洲境內，一般來說若要離開西班牙前往其他國家，是需要PCR陰性報告的；不過不知是加泰隆尼亞還是西班牙跟安道爾有協議，所以彼此雙國的居民往返兩地，都不需要提出檢疫證明。

安道爾被稱為雪國，所以很多人以為來這裡只能滑雪，其實大錯特錯。這裡冬天能滑雪，夏天能在庇里牛斯山踏青，像我就是個很喜歡遠足的人，這裡對我來說，是遠離塵囂再好不過的去處了。

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【關於🇦🇩安道爾 Andorra】

根據歷史，西元803年查理曼大帝從穆斯林手中搶回了這個地方，之後經歷了13世紀主教與Foix伯爵間的鬥爭，以及憲法的誕生，在1993年的公投下，這裡成為了一個獨立、民主的議會制公國。尤其在兩次世界大戰都維持中立國的舉動，讓該地的經濟提升不少。

被劃分成七個教區的安道爾的居民不到八萬人口（除了安道爾本地人外，以西班牙人、葡萄牙人和法國人居多），官方語言是加泰隆尼亞語，但是在那裡說西班牙語一點問題也沒有。安道爾幾乎沒有什麼名勝古蹟的它卻也總能吸引許多遊客前來：天氣好時來充滿綠意的山區健行，入冬下雪後則是一處又一處的滑雪勝地；此外，喜歡採購的人也不會錯過安道爾城（Andorra La Vella）佈滿購物場所的大街，商品都是免稅的，很多人都會特地來這裡採買電子產品、菸酒、保養品、精品衣物、各式食品⋯⋯等等。豪斯說他們小時候來這裡連糖都會一起買，離去時也一定要把車子加滿油。

除了健行、滑雪、購物外，這裡還有許多景色優美的小村莊，適合週末時來走走，遠離塵囂。
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我記得我一開始並沒有很喜歡安道爾，覺得那不過是一個採購的地方，但當我更深入認識安道爾且更往北部走時，我便完全讓安道爾的山景給迷住了，動不動就想來這裡爬山。所以當週日出了大太陽，我們趕緊抓住時機，早餐隨意吃吃就辦了退房，然後開車往安道爾的西北邊去。我們的目的地是Tristaina高山湖泊群，也是2020 年10月起被聯合國教科文組織列為生物圈保護區。聽說跨國湖泊群的山，另一邊就是法國了。

從我們市中心的飯店離開，經過好多漂亮的綠野小鎮，拐個彎往左上山，沿途九彎十八拐的，還不時遇到自行車車隊。這條路曾今舉辦過幾次法國自行車賽，請記得：若你開車遇到自行車，絕對不可以直接超車，要等到對面沒來車，且確定能跟自行車維持1.5公尺的寬度距離時，才能超車。

半個多小時後，我們經過由雕塑家 Mauro Staccioli 所設計的直徑4公尺寬的壯觀鋼環 Arcalís 91 紀念碑，再往前，就抵達了Ordino Arcalís的滑雪場了。

夏天滑雪場顯得特別空曠，高山伴著溪水川流不息，滑雪登山纜車高掛在電纜上，隨著風輕微搖擺晃動。我們把車停好，從車裡拿出了登山杖，換上登山鞋，背上裝備還算齊全的後背包，穿件運動外套，我們就開始上山了。

之前上網看說有黃色指標指引你前往，不過我們沒注意到，跟著人群走就是了。

這段山路不難走，沿途老老少少都有，但畢竟在庇里牛斯山嘛，許多高低不平或高或低的起伏，讓人覺得拿登山杖行走會更舒服些。山路不寬，不過遠足者都很有默契，看到對面有人來時，就自動靠邊讓路，頭還會不自主撇往一旁，都是因為疫情讓人仍有所小心。相信我，只要再堅持一點點，莫約40分鐘左右，就能抵達山頭，然後你會驚嘆眼前所看到的Tristaina湖泊群。

最先引入眼簾的是最小但最藍的Primer湖，再往前走，是被碎石和山丘圍繞的Mig湖，最後是呈圓形也是最大的 Més Amunt湖，就位在2878公尺高的山坡上。對了，這裏是屬於典型的高山冰川區，據說夏天很熱的時候還會有人在這裡戲水。

天氣好的時候，很多人會沿著高山的環形路線來場湖區健行，兩千三百多公尺高的海拔，距離約4.4公里，需三個小時左右才能走完。不過我們擔心多變的氣候，以及糧食也不夠，所以只在山上待了一個多小時，當發現另一邊的烏雲正朝這裡慢慢飄過來時，我們知道該下山了。

我很難形容當下自己的感受，小小一個人置身在壯大的庇里牛斯山群裡，幾百年的冰川搭配高山景觀，遼闊的牧場與層林覆蓋的山谷，那種心曠神怡之感，在這裡一再上演。

有機會，來安道爾健行吧。

ℹ️ 分享我們這次的旅遊資訊：

📱西班牙手機到安道爾無法免費漫遊，所以進入之前要記得開飛航模式，建議先下載Google的離線地圖。

🏨 Hotel NH Andorra La Vella: Av. Dr. Mitjavila, 1, Andorra la Vella, Andorra（飯店提供付費室內私人停車場）

🛍️ 購物區: Avenida Meritxell, Fener Boulevard 和Vivand.

🍴Marisqueria Don Denis: c/ isabel sandy 3, Escaldes-Engordany, Andorr

🍴Molí dels Fanals: Av. de les Comes, 3, AD400 Sispony, Andorra

🍴 A Casa Canut Hotel Gastronomic: 107 Av Carlemany, Escaldes-Engordany Andorra

🍴 Restaurant 120： Av. Meritxell, 120, Andorra la Vella, Andorra

🅿️ Estación de esquí Ordino Arcalís滑雪場的停車場: Ctra. d'Arcalís, Ordino, Andorra

《qPCR檢測的私隱問題》
PCR是複製DNA的方法，過程需要稱為「引物」(primer)的物質。簡單說，引物是一個引子，包含了指定序列，你可以當是Microsoft Word裡的Find功能，一般是有一對，簡稱F和R，分別代表從何開始，從何結束。PCR，就是由起始引子相應的序列，複製到結束引子相應的序列。打個比方，起始引子是「我們在天上的父」，結束引子是「直到永遠，阿門。」，PCR就會把整段《主禱文》複製出來。

檢測武漢病毒的qPCR，一般進行兩到三組，各有一對primer，分別對應武漢病毒的不同基因。理論上，如果這Find功能找到了武漢病毒的基因，就會將其複製倍化，過程發出螢光訊號。觀察螢光，就可以估計有否倍化。而為了確保樣本有人類基因以及PCR過程順利，以減低假陰性機會，最理想是同時用對應人類基因的primer，因為理論上如果樣本沒問題，一定會有人類基因。（這又稱作內部對照組/internal control)

實驗設計上，這是非常合理的。然而從私隱層面上，政府或公司有權倍化人類的基因嗎？本來的primer設計，是從你的電腦文件中複製《主禱文》，但只要將primer換成「全澳門最大」和「上線啦」，就可以複製出《賭場廣告》，便知道你有沒有看AV了。誰授權政府，可以用這primer，不可以用那primer呢？

用特定primer組合來找出器官匹配度相關資訊，這種隨便想都能想到的方法，當然有人做了，而且廿幾年前已經做了。這說明單單用檢測武漢病毒同樣的檢測平台，足以找出你各樣基因資訊。

當然，現在有更多更先進的方法，不用靠PCR。我們系統性地交出人類樣本，中間有什麼人處理，拿來做過什麼實驗，更無人知曉。

然而，政府並無公開他們用什麼primer組合，什麼實驗設計，什麼準則判定陽性，更遑論樣本的處理過程（之前就發生了公司交叉感染樣本的情況。）。另邊廂，我們也從不討論這技術必然會引伸的私隱問題。

很多本業就是做人類基因定序的公司，得了這麼大量的人類樣本，難道不會偷偷看一眼？難道陳冠希叫你幫他修電腦，你不會看一眼？

（用PCR找出你器官匹配度的方法：
https://link.springer.com/protocol/10.1007%2F978-1-62703-493-7_8）